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StarLighter Script IV First Strand cDNA Synthesis Kit

发布日期:2023-05-16 返回列表

StarLighter Script IV First Strand cDNA Synthesis Kit

(StarLighter Script IV 第一链cDNA合成试剂盒)


产品简介

本试剂盒采用最新一代逆转录酶(第四代基因工程改造酶)研制的一管式逆转录 Mix, 包含了逆转录所需的逆转录酶、随机引物、Oligo dT 等反应组分,可在体系中直接加入 RNA 模板即可进行逆转录反应。最新一代的逆转录酶耐受高温,可在 42°C-65°C 温度下表现出良好的逆转录活性, 能有效逆转录复杂结构的 RNA。


产品优势

1. 耐高温、有效逆转录结构复杂的 RNA 模板;

2. 逆转录效率高, 准确反映模板信息;

3. 兼容高 GC/AT 模板以及降解样本,操作简单。


产品应用

1. 基因表达分析;

2. RNA 病毒检测;

3. 极低拷贝基因检测。


产品性能

1、 逆转录结果准确反映模板量信息

以 RNA 起始量为 0.2 ng-2000 ng 进行反转录,用 qPCR 进行定量,反转录模板量对应的 log 值与 qPCR Ct 值之间有很好的线性关系。

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Fig.1 不同试剂逆转录的产物 qPCR 结果比较。以起始量 0.2 ng-2000 ng 的人 Hela 细胞系 RNA(已去除DNA) 为模板进行逆转录,取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板,并用线上购彩app Starlighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验(YWHAZ 引物,产物 249 bp,产物 GC 含量44.6%),以逆转录模板对应的 log 值与 qPCR Ct 值进行作图,线上购彩app以及供应商 TA2、AB-III 表现出非常好的线性关系,且扩增效率 在95-110%之间。


2、逆转录效率高

GC 含量为 60-75%,线上购彩app逆转录试剂和 AB-III 在 4 ng-2000 ng 范围内均表现出很好的逆转录效率。

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Fig.2 不同试剂的逆转录效率比较。将 1000 ng RNA input 的逆转录效率设为 100%,根据试验结果计算各试剂盒自身在不同起始量时的相对逆转录效率。


3、轻松应对高 GC 模板的逆转录及定量

对于 GC 含量为 75.5% 基因(人 ApoE)逆转录及定量,线上购彩app逆转录试剂盒获得极好的 input 及 output 线性关系, R2=1。

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Fig.3 用不同试剂逆转录的产物进行 qPCR 定量,比较高 GC 片段定量结果。以不同起始量的人 Hela 细胞系 RNA(已去除DNA) 为模板进行逆转录,取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板,并用线上购彩app StarLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验(ApoE 引物,产物 322 bp, 产物GC 含量 75.5%),比较不同逆转录试剂的逆转录 RNA 量与 qPCR Ct 值间的线性关系。


4、轻松应对降解、 低起始量样本


反转录模板

起始量(ng)

RIN 值引物HMBS引物YWHAZ
20230.18

Eff%=95.6,R2=1.000

24.64EFF%=97.5,R2=0.999
233.6128.20
0.2Undetermined31.41
20428.93

Eff%=103.6,R2=0.998

23.93EFF%=93.9,R2=0.999
232.4527.60
0.235.4130.89
20628.81

Eff%=106.4,R2=0.991

23.91EFF%=95.7,R2=0.998
232.5127.61
0.235.1730.77
208
28.89

Eff%=103.4,R2=0.993

23.75EFF%=95.5,R2=1.000
232.6027.50
0.235.3830.62


Tab.1 StarLighter Script RT all-in-one Mix 逆转录不同完整性的 RNA 模板,逆转录产物定量结果展示。以不同降解程度的 RNA 为模板,连续梯度稀释 (20-0.2 ng) 为模板进行反转录,取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板,并用线上购彩app StarLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验。线上购彩app逆转录试剂盒均能有效逆转录,且模板量 Log 值与 Ct 值之间表现出极好的线性关系,扩增效率在 90-110% 之间。



5、兼容多种类型样本

与供应商 TA2、TS 相比,线上购彩app逆转录试剂盒在各种不同样本中均表现出良好性能,Ct 值更低。

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Fig.4 不同试剂对不同物种的 RNA 进行逆转录,并对产物进行定量。以不同物种的 RNA 200 ng 为模板进行逆转录,取 1/10体积逆转录产物定量模板,并用线上购彩app StraLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验,比较不同逆转录试剂的 Ct 值。



说明书下载

FS-P1004 StarLighter Script IV First Strand cDNA Synthesis Kit-说明书.pdf



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